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一個使用了120年的依舊年輕的技術(shù)-凱氏定氮
點擊次數(shù):1127 更新時間:2024-02-22

凱氏定氮法是由丹麥化學(xué)家凱道爾于1883年建立的。

凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下,用濃硫酸消化樣品將有機氮都轉(zhuǎn)變成無機銨鹽,然后在堿性條件下將銨鹽轉(zhuǎn)化為氨,隨水蒸氣蒸餾出來并為過量的硼酸液吸收,再以標(biāo)準鹽酸滴定,就可計算出樣品中的氮量。由于蛋白質(zhì)含氮量比較恒定,可由其氮量計算蛋白質(zhì)含量,故此法是經(jīng)典的蛋白質(zhì)定量方法。

凱氏定氮儀 產(chǎn)品應(yīng)用及優(yōu)點:

DRK-K616全自動凱氏定氮儀是根據(jù)凱氏定氮法進行氮含量測定的自動智能化分析儀。它可廣泛應(yīng)用于食品加工、飼料生產(chǎn)、煙草、畜牧、土肥、環(huán)境監(jiān)測、醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)、科研、教學(xué)、質(zhì)量監(jiān)督等領(lǐng)域做常量、半微量樣品氮與蛋白質(zhì)的分析,還可用于銨鹽、揮發(fā)性脂肪酸/堿等的檢測。用凱氏定氮法測定試樣時,需經(jīng)過 消化、蒸餾、滴定 三個過程。蒸餾和滴定是DRK-K616型凱氏定氮儀的主要測定過程。

DRK-K616型凱氏定氮儀是根據(jù)經(jīng)典凱氏定氮法設(shè)計的全自動蒸餾,滴定測氮系統(tǒng);該儀器給實驗室測定人員在進行測定氮—蛋白質(zhì)過程中,提供了極大的方便,且具有使用安全,可靠;操作簡單,省時等特點。中文對話界面使用戶操作方便,界面友好,顯示的信息豐富,使用戶能夠快速掌握儀器的使用。

根據(jù)凱氏定氮原理測定,需要三個步驟,即消化、蒸餾、滴定。

凱氏定氮 工作原理——消化

將含氮的有機化合物(蛋白質(zhì))與濃硫酸和催化劑(硫酸銅或凱氏消化片)一同加熱,使蛋白質(zhì)分解,其中碳和氫被氧化成二氧化碳和水逸出,而樣品中的有機氮轉(zhuǎn)化為氨(NH3)并與硫酸結(jié)合形成硫酸銨。(銨 NH4+)

消化過程:

微火加熱煮沸,燒瓶內(nèi)物質(zhì)炭化變黑,產(chǎn)生大量泡沫,泡沫消失后加大火力保持微沸狀態(tài),至液體成藍綠色澄清狀態(tài)后繼續(xù)加熱 05-1h,結(jié)束后冷卻。

(可使用自動消解儀完成前處理工作)

凱氏定氮 工作原理——蒸餾

得到的溶液經(jīng)稀釋定容后加入NaOH,蒸餾釋放出NH3,冷凝之后收集于硼酸溶液中。

蒸餾過程:

先將消化好的樣品進行稀釋,加入NaOH,經(jīng)過加熱后產(chǎn)生的氨氣進入冷凝管,經(jīng)過冷凝之后流入裝有硼酸溶液的接收瓶中。形成硼酸銨。

(硼酸溶液中加有混合指示劑,形成硼酸銨之后吸收液由酸性變?yōu)閴A性,顏色由紫紅轉(zhuǎn)變?yōu)樗{綠色。)

凱氏定氮 工作原理——滴定

用已知濃度的鹽酸標(biāo)準溶液進行滴定,根據(jù)鹽酸消耗的量來計算出氮的含量,然后乘以相應(yīng)的換算因子,即得到蛋白質(zhì)的含量。

(滴定是指一種定量分析的手段,也是一種化學(xué)實驗操作。它通過兩種溶液的定量反應(yīng)來確定某種溶質(zhì)的含量,是根據(jù)指示劑的顏色變化指示滴定終點,然后目測標(biāo)準溶液消耗體積,計算分析結(jié)果)

滴定過程:

用鹽酸標(biāo)準溶液滴入硼酸銨溶液中,使溶液的顏色由藍綠色變?yōu)闇\紅色。

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